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高效液相色譜法提高紅曲細菌分離與分析的效果
發(fā)布時間：2019/11/4 15:36:52 瀏覽次數(shù)：1691
DOI：
中文關(guān)鍵詞: 高效液相色譜技術(shù) 紅曲 分離 鑒定 變性梯度凝膠電泳
英文關(guān)鍵詞:
中文摘要:
為了探討高效液相色譜技術(shù)（HPLC）在復(fù)雜微生態(tài)體系中微生物分離、分析的應(yīng)用潛力，提高現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)檢測的靈敏度和準確性，本文選取紅曲作為模式體系，優(yōu)化紅曲中細菌樣品的制備方法，應(yīng)用HPLC技術(shù)對紅曲中的生產(chǎn)菌株進行分離，并結(jié)合變性梯度凝膠電泳（DGGE）、細菌16S rDNA鑒定方法對色譜分離得到的菌株進行鑒定。結(jié)果顯示：根據(jù)HPLC紫外檢測圖譜收集到5個明顯的洗脫峰，其中有3個洗脫峰經(jīng)DGGE分析為單一條帶，16S rDNA鑒定洗脫峰分別包括環(huán)狀芽孢桿菌、銅綠假單胞菌、人參土芽孢桿菌和脂肪酸芽孢桿菌。研究表明，高效液相色譜技術(shù)能夠從復(fù)雜的紅曲微生物樣品中分離出單一的細菌，與傳統(tǒng)PCR-DGGE技術(shù)相比，無需進行膠回收便可實現(xiàn)16S rDNA的直接測序，且具有準確性高，試驗周期短，細菌細胞可回收等優(yōu)點。色譜分離技術(shù)在下一代測序技術(shù)中的應(yīng)用潛力也在探討中。
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